Сдхб / сдха имунохистохемија код феохромоцитома и параганглиома: мултицентрична анализа варијације интеробсервера помоћу виртуелне микроскопије: мултинационална студија европске мреже за проучавање надбубрежних тумора ( ) | савремена патологија

Сдхб / сдха имунохистохемија код феохромоцитома и параганглиома: мултицентрична анализа варијације интеробсервера помоћу виртуелне микроскопије: мултинационална студија европске мреже за проучавање надбубрежних тумора ( ) | савремена патологија

Anonim

Субјекти

  • Тумори надбубрежне жлијезде

Апстрактан

Упркос утврђеној улози СДХБ / СДХА имунохистохемије као драгоценог средства за идентификацију пацијената који су у ризику од синдрома феокромоцитома / параганглиома повезаних са сукцинатом сукцинатом дехидрогеназом, репродуктивност метода процене још није утврђена. Циљ ове студије био је истражити варијабилност интеробсервера међу седам експертних ендокриних патолога користећи веб методу виртуелне микроскопије у великој мултицентричној кохортици феокромоцитом / параганглиома ( н = 351): (1) 73 мутирана СДХ , (2) 105 нон- СДХ је мутирао, (3) 128 узорака без идентификованих СДХ-к мутација и (4) 45 са непотпуном СДХ молекуларно-генетском анализом. Значајан договор између свих рецензената примећен је било са двостепеном класификацијом (СДХБ κ = 0, 7338; СДХА κ = 0, 6707) или са тростепеним класификацијским приступом (СДХБ κ = 0, 6543; СДХА κ = 0, 7516). Консензус је постигнут у 315 случајева (89, 74%) за СДХБ имунохистохемију и у 348 случајева (99, 15%) за СДХА имунохистохемију. Међу сличним случајевима, 62 од 69 (~ 90%) мутираних СДХБ- / Ц- / Д- / АФ2 случајева показало је имунонегативност СДХБ и имуносупозитив СДХА, 3 од 4 (75%) са СДХА мутацијама показало је губитак СДХА / СДХБ протеина експресија, док је 98 од 105 (93%) нон- СДХ -к-мутираних колега показало задржавање експресије протеина СДХА / СДХБ. Два СДХД- мутирана екстра-адренална параганглиома су оцењена као СДХБ имунопозитивна, док је 9 од 128 (7%) тумора без идентификованих СДХ-к мутација, 6 од 37 (~ 16%) ВХЛ- мутираних, као и 1 од 21 (~ 5%) НФ1- мутирани тумори су процењени као СДХБ имунонегативни. Иако је 14 од тих 16 случајева имунонегативних СДХБ-а био метастатски, опажена је свеукупна значајна корелација између имунонегативности СДХБ-а и малигности ( П = 0, 00019). Закључујемо да је СДХБ / СДХА имунохистохемија поуздан алат за идентификацију пацијената са СДХ-к мутацијама са додатном вредношћу у процени генетских варијанти непознатог значаја. Ако СДХ молекуларно-генетска анализа не успе да открије мутацију у СДХБ-имунонегативном тумору, препоручује се метилација СДХЦ промотора и / или ВХЛ / НФ1 тестирање уз употребу циљаног секвенцирања следеће генерације.

Главни

Феокромоцитоми и параганглиоми су неуроендокрини тумори који потичу из неурона, настали из надбубрежне медуле и симпатичке / парасимпатичке параганглије. 1 Оне имају највиши степен наслеђивања међу људским новотворинама. Герлине и / или соматске мутације најмање 18 гена ( НФ1 , РЕТ , ВХЛ , СДХА , СДХБ , СДХЦ , СДХД , СДХАФ2 , ТМЕМ127 , МАКС , ХИФ2А , КИФ1Б , ПХД1 , ПХД2 / ЕГЛН1 , ФХ , ХРАС , БАП1 и МЕН1 ) укључени су у развој тумора, са ∼ 40% који носе мутацију гермлине и додатних 25-30% соматске мутације. 2, 3, 4

Синдром породичних сукцинатских дехидрогеназа повезаних феокромоцитом / параганглиома узроковани су мутацијама СДХА , СДХБ , СДХЦ , СДХД и СДХАФ2 (колективно СДХ-к ) и наслеђују се као аутосомно доминантна својства. 4 Ови синдроми предиспонирају не само феохромоцитоме / параганглиоме, већ и стромалне туморе гастроинтестиналног система, карцином бубрежних ћелија и аденоми хипофизе. 5, 6, 7 У огромној већини тумора повезаних сукцинантних дехидрогеназа долази и до губитка СДХБ и / или СДХА експресије протеина који се могу открити имунохистохемијом. 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41 Конкретно, СДХБ -, СДХЦ - и СДХД- мутирани тумори показују СДХБ имунонегативност, али СДХА имунореактивност, док СДХА- мутирани тумори показују негативност и за СДХБ и за СДХА имуностање. Гастроинтестинални стромални тумори и параганглиоми повезани са Царнеи-овом тријадом (синдромно али не-наследно удружење гастроинтестиналног стромалног тумора, параганглиома, плућне кондроме, адренокортикалног аденома и леиомома једњака), 4 показују негативно бојење за СДХБ у одсуству СДХ-к мутација. 29, 40 Постоје привремени докази да тумори повезани са Царнеи-овом тријадом показују соматску хиперметилацију локуса промотора СДХ, 42 и стога негативно бојење за СДХБ такође могу идентификовати ове случајеве који нису пронађени конвенционалним молекуларним тестирањем.

Пошто је губитак СДХБ / СДХА експресије предиван за основну мутацију гермлине СДХ-к , 8, 10, 11, 17, 21, 22, 23, 24, 29, 34, 39, улога имунохистохемије СДХБ / СДХА је подвучена као допунски приступ у молекуларно-генетском тестирању посебно за феокромоцитоме и параганглиоме. 8, 10, 11 Будући да је Сангер или циљана анализа следеће генерације свих гена осетљивости на феокромоцитом / параганглиом напорна и / или захтева клиничке молекуларно-дијагностичке лабораторије, 43, 44, 45, можда би било примерено да се имунохистохемија користи за идентификацију пацијената са сукцинатом синдроми феокромоцитома / параганглиома повезани са дехидрогеназом. Поред тога, присуство мутације СДХБ један је од најјачих предиктора за метастазе и, потом, лош исход код феохромоцитома / параганглиома. 4 У овом контексту, предложено је да комбинација ГАПП-а (система за оцењивање адреналног феокромоцитома и параганглиома) и СДХБ имунохистохемије може бити драгоцена помоћ у предвиђању метастатске болести, 46 што даље захтева исправну интерпретацију СДХБ / СДХА имуностаинингс.

С обзиром на високу преваленцију неочекиване наследне болести, лажно позитивне и лажно негативне процене имуностанација СДХБ / СДХА могу довести до неуспеха у идентификовању особа оболелих од феокромоцитома / параганглиома са повећаним ризиком за сукцинатне неоплазије повезане са дехидрогеназом, погрешна интерпретација патогеност генетских варијанти несигурног значаја и неприкладна генетска испитивања. Пошто недостају студије које се баве проблемом варијације интеробсервера за имунохистохемију СДХБ / СДХА у феокромоцитомима / параганглиомима, проценили смо споразум о интеробсерверу између практиковања експертних ендокриних патолога путем виртуелне микроскопије у великој мултицентарној, мултинационалној кохетији генетски добро окарактерисаних тумора. Сходно томе, испитали смо валидност СДХБ / СДХА имунохистохемије да бисмо идентификовали пацијенте са сукцинатним феокромоцитомима / параганглиомима повезаним са сукцинатом дехидрогеназом и СДХБ имунохистохемијом као маркером малигности.

Резултати

Споразум о интеробсерверима који следи двостепеном класификационом приступу (тј. Позитиван и слаб дифузни / негативни) кретао се од умереног до готово савршеног за СДХБ имунохистохемију и од фер до савршеног за СДХА имунохистохемију (Табела 1). Што се тиче имунохистохемије СДХБ, највећи договор постигнут је између посматрача 2 и 3 ( κ = 0.8593), а најнижи између посматрача 4 и 7 ( κ = 0.5318), док је у погледу имунохистохемије СДХА постигнут највећи договор између посматрача 6 и 2 / 7 ( κ = 1.0000) и најнижа између посматрача 4 и 5 ( κ = 0.3542). Сви споразуми су били веома значајни ( П <0, 0001). Значајан договор између свих рецензената примећен је било са двостепеном класификацијом (СДХБ κ = 0, 7338; СДХА κ = 0, 6707) или са тростепеним класификацијским приступом (СДХБ κ = 0, 6543; СДХА κ = 0, 7516). Приметно, посматрач 1 као и посматрачи 3/4/5 нису оценили никакав дијапозитив као хетерогени узорак за СДХБ и СДХА имунохистохемију, респективно.

Табела пуне величине

Консензус патолога постигнут је у 348 случајева (99, 15%) за имунохистохемију СДХА и у 315 случајева (89, 74%) за имунохистохемију СДХБ. Од 69 узорака тумора са СДХБ / СДХЦ / СДХД / СДХАФ2 мутацијама, 62 (89, 85%) је показало СДХБ имунонегативност и СДХА имунопозитивност, док су 3 од 4 са СДХА мутацијама (75%) показале губитак експресије протеина СДХА / СДХБ (Слика 1) . Два додатна надбубрежна параганглиома (ц.274Г> Т п.Асп92Тир и ц.405делЦ п.Пхе136Леуфс * 32) су оцењена као СДХБ имунопозитивна од стране 5 посматрача и као имунонегативна (слаба дифузна) од стране осталих посматрача (посматрачи 2 / 5).

Image

Image

СДХА и СДХБ имунохистохемија у феокромоцитомима / параганглиомима обдарена је било мутацијом СДХА гермлине која показује губитак експресије протеина СДХА / СДХБ или са мутацијама СДХБ , СДХЦ , СДХД и СДХАФ2 која показују губитак СДХБ, али нетакнута СДХА експресија. Обратите пажњу на грануларно цитоплазматско бојење за СДХА / СДХБ у нормалним ћелијама интратуморне фиброваскуларне мреже које служе као унутрашње позитивне контроле.

Слика пуне величине

Сви тумори који садрже мутацију РЕТ , ТМЕМ127 , ХИФ2А и ХРАС , 31 од 37 тумора са мутираним ВХЛ (83, 7%) и 20 од 21 НФ1 мутираних тумора (95, 2%) показали су задржавање СДХБ / СДХА експресије (Слика 2). Шест бенигних ВХЛ- мутираних феокромоцитома (6 од 37; ~ 16%) и један малигни НФ1- мутирани екстра-адренални параганглиом (1 од 21; ~ 5%) процењени су као СДХБ имунонегативни ( ВХЛ : сви посматрачи (3 случаја) ), 6 посматрача (1 случај) и 5 ​​посматрача (2 случаја); НФ1 : 6 посматрача (1 случај)) у недостатку СДХ-к мутација у четири од ових случајева (два су испитана на клизној линији, један на гермлине и соматске, а једна на соматском нивоу). Подаци о тачним мутацијама били су доступни само у четири случаја ( ВХЛ п.Сер80Асн, п.Арг161 *, п.Арг167Глн и НФ1 п.Трп561 *).

Image

Image

Image

Нетакнута експресија СДХБ и СДХА протеина у не- СДХ-к- мутираним параганглионским туморима који садрже гермлине или соматске ВХЛ , РЕТ , НФ1 , ТМЕМ127 , МАКС , ЕПАС1 и ХРАС мутације. Обратите пажњу на грануларно цитоплазматско бојење за СДХА / СДХБ у нормалним ћелијама интратуморне фиброваскуларне мреже које служе као унутрашње позитивне контроле.

Слика пуне величине

У недостатку СДХ-к мутација, 119 од 128 параганглионских тумора (93%) је оцењено као СДХБ / СДХА имунопозитивно, док је остатак (9 од 128; 7%) као имунонегативан СДХБ / СДХА имунопозитиван. Клиничко-генетски подаци ових четирију независних центара детаљно су приказани у табели 2.

Табела пуне величине

Извештавају се неусклађене оцене имунохистохемије СДХБ код 5 тумора обдарених мутацијама СДХ-к ( СДХД / СДХБ / СДХАФ2 ), 11 тумора са мутираним ВХЛ - и 2 РЕТ , као и 18 тумора без идентификованих СДХ-к мутација, док је СДХА имунохистохемија односио се на 2 СДХ-к- мутирана тумора ( СДХА- / СДХД- ) и 1 НФ1 -мутирани тумор. Класификација обојења као „неинформативна“ и „хетерогена“ представљала је главни разлог за СДХБ / СДХА имунохистохемијске разлике у подскупини СДХ-к- мутиране, док је категорија „слаба дифузна“ углавном припадала онима у СДХ-к- вилд- тип и ВХЛ- мутиране подскупове.

Повезаност између предвиђеног генетског статуса СДХ и имунохистохемије СДХБ испитивана је за сваког посматрача. Осетљивост овог приступа, дефинисана као проценат СДХ-к мутираних тумора који су имунонегативни на СДХБ, кретала се у распону од 83, 58 до 98, 57% (значи 94, 23%). Специфичност, дефинисана као проценат или не- СДХ - к- мутираних тумора или тумора без идентификованих СДХ-к мутација које су имунопозитивне на СДХБ, варирала је између 74, 03 и 96, 11% (средња 84, 35%) као и 83, 06 и 92, 91% (средње 86, 67%). Посматрач 1 био је најбољи предиктор са Иоуденовим индексом 0, 880 и 0, 860 (Табела 3). Примећена је значајна повезаност између имунонегативности СДХБ-а и малигности ( П = 0, 00019). Не може се показати повезаност између СДХД мутација и слабог дифузног узорка на СДХБ имунохистохемији ( П = 0, 1490).

Табела пуне величине

Дискусија

Имунохистохемија је револуционирала праксу ендокриних патологија током последње деценије. Паралелно са недавним напретком у молекуларној генетици, показано је да имунохистохемија открива различите врсте молекуларних промена, односно БРАФ В600Е мутацију у папиларним карциномима штитњаче, 48 ПТЕН мутација у различитим неопластичним лезијама штитњаче, 49 мутација ЦТННБ1 у крилиформно-моруларној варијанти папиларни карцином штитне жлезде, недиференцирани карциноми штитне жлезде и адренокортикални карциноми, мутације 48, 50, 51 ТП53, као и мутације у поправљању неусклађености ( ММР ) гени, као што су МЛХ1 , МСХ2 , МСХ6 и ПМС2 у адренокортикалним карциномима, 51, 52, 53 ХРПТ2 мутације у паратиреоидним карциномима и аденомима синдрома хиперпаратиреоидизма-синдрома чељусти, 48, 54 мутације ПРКАР1А у туморима повезаним са Царнеиевим комплексом, 55, 56, 57 и СДХ- , ФХ-, као и МАКС штетне мутације у феокромоцитомима / параганглиомима . 8, 10, 11, 58, 59

Губитак експресије протеина СДХБ примећен је у феокромоцитомима / параганглиомима који носе мутацију у било којем од СДХ гена или соматском хиперметилацијом СДХЦ промоторског региона, 42 док се губитак имунореактивности СДХБ и СДХА показује само у контексту мутације СДХА . 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 У складу са претходним студијама, 8, 10, 11, 17, 18, 19, 20 СДХБ - / Ц - / Д - и СДХА- мутирани тумори приказали су горе наведене имуноекспресијске обрасце са СДХАФ2- мутираним колегама који показују СДХБ имунонегативност и СДХА имунопозитивност. Изразито, сви тумори који садрже мутацију РЕТ , ТМЕМ127 , ХИФ2А и ХРАС показали су задржавање СДХБ / СДХА експресије, док је шест бенигних ВХЛ- мутираних феокромоцитома и један малигни НФ1- мутирани екстра-адренални параганглиом оцењивани као СДХБ имунонегативни. Последњи је у контрасту са претходним опажањима у 37 феокромоцитома / параганглиома и 14 феокромоцитома обдарених ВХЛ 8, 11 и НФ1 мутацијама, 8, 10 респективно. Употребом мишјег моноклонског (21А11) СДХБ антитела у ниској концентрацији (1 на 1000), Гилл и остали 10 сугерисали су да се тумори повезани са ВХЛ могу класификовати као негативни или слаби дифузни, а не позитивни, што показује двосмерни приступ две концентрације. СДХБ антитела. 8 У складу са тим, губитак експресије протеина СДХБ недавно је приказан у подскупини парагенглионских тумора који су мутирани НФ1 (Ј Фавиер 2014, лична комуникација). Издвојена могућност двоструког мутанта, која потенцијално објашњава имунонегативност СДХБ додатном мутацијом СДХ-к , искључена је у четири од тих седам случајева који се јављају у окружењу с недостатком ВХЛ - и НФ1 .

Да би се додатно проширила ранија запажања, 8, 11 9 од 128 (7%) тумора без идентификованих СДХ-к мутација процењени су као СДХБ имунонегативни (Табела 2). Ван Недервеен и остали 8 и Цастелбланцо и остали 11 пријавили су 9 случајева (6 од 53; 11% и 3 од 19; 15, 7%) који су показали губитак СДХБ експресије у одсуству СДХБ , СДХЦ , СДХД , ВХЛ или РЕТ мутација. Ипак, овим студијама није недостајало или СДХА / СДХАФ2 генетичког тестирања 8, 11 или скрининга за велике СДХ-к делеције 11 који могу да резултирају вишим процентима. Интригантно је да је у овој студији осам СДХБ-имунонегативних тумора било метаметастатски у одсуству мутација СДХ-к (Табела 2), што је у великој мери слична с Царнеи-овим триадом повезаним колегама у погледу имунохистохемије СДХБ и биолошког понашања. 4, 29, 60 Пошто соматска хиперметилација СДХЦ није испитивана, не може се проценити могућност да су поменути тумори представљали случајеве Царнеиове тријаде. Ипак, као што је овде приказано, укупни имунохистохемијски статус СДХБ је снажно повезан са клиничким понашањем феокромоцитома / параганглиома, додатно јачајући улогу имунохистохемије СДХБ као прогностичког маркера. 46, 61

Наши подаци јачају идеју да је имунохистохемија валидан алат за идентификацију пацијената који су у ризику од синдрома феокромоцитома / параганглиома повезаних са сукцинатом сукцинатом, мада понекад то може бити тешко чак и у специјализованом окружењу (Табела 3). Појашњавајући овај последњи, пет посматрача оцењено је да су два посматрачка параганглиома са мутацијама и погрешним СДХД мутацијама оцењена као СДХБ имунопозитивна. Слично одступање раније је објављено за екстра-адренални параганглиом који садржи глупо СДХД мутацију (ц.14Г> А п.Трп5 *) код пацијента са Царнеи Стратакис синдромом. 31 С обзиром на то да је пацијент додатно развио СДХБ-имунонегативни стромални тумор 31 и да су идентичне мутације и глупости СДХД мутације у другим туморима довеле до одсуства СДХБ експресије, 5, 8, могуће је да је било други погодак гена СДХД у параганглиом је резултирао неактивним сукцинатим комплексом дехидрогеназе са очувањем антигености или да је интерпретација била погрешна. Напомињемо да је сваки патолог у тренутној студији пропустио бар један тумор повезан са СДХ-к , а ове најчешће укључиване мутације у СДХД-у. Ово сугерише СДХД имунохистохемију као потенцијални комплементарни алат имунохистохемији СДХБ за идентификацију болесника који су мутирани СДХД-ом. 62 Даље додавање оним ретким породичним случајевима које карактерише несклад између молекуларно-генетских аберација гена за супресор тумора и задржавање експресије протеина, 63 једног папиларног карцинома бубрежних ћелија који настају код пацијента са СДХЦ мутацијом гермлине миссенсе (ц.3Г> А стр. М1И) и прикривајући соматски губитак хетеророзности СДХЦ локуса парадоксално је показао имунопозитивност на СДХБ. 36 Узето заједно, СДХБ имунохистохемију и СДХ-к генетску анализу треба посматрати као комплементарне тестове. У случајевима јаке клиничке сумње, требало би узети у обзир накнадну мутацијску анализу упркос задржавању СДХБ експресије.

Добар ниво обновљивости у тренутној студији може или одражавати висок ниво искуства са оцењивањем СДХБ / СДХА имуностанација међу стручним ендокриним патолозима или може делимично бити приписан чињеници да су дате врло прецизне смернице за оцењивање. Сходно томе, било би од суштинског значаја дати такве смернице у обрасцима за клиничко извештавање 64, као и водити развој алгоритама за рачунарску дијагностику у перспективи дигиталне патологије. Класификација обојења као „неинформативна“ и „хетерогена“ представљала је главни разлог за СДХ / СДХБ имунохистохемијске разлике у мутираној подскупини СДХ-к , док је категорија „слаба дифузна“ углавном била недоследност у СДХ-к- дивљи тип и ВХЛ- мутирани подскупови. То би се потенцијално могло приписати (1) техничкој варијабилности због разлика у времену фиксације, концентрације пуферног формалина и / или старости блокова уграђених у формалин, парафина, 10, 11 (2), на пример, смањена биолошка варијабилност Нивои СДХБ протеина у паралелно-мутираним туморима са ВХЛ- ом, 65 или чак до (3–4) појединачних концепција и искуства специфичних протокола бојења, као што је показано имунохистохемијом за ММР протеине. 66 Технички субоптималне имуностације нису неочекивано нађене у вези с чињеницом да је материјал добијен из више лабораторија за патологију, свака пратећи сопствено фиксирање и уграђивање протокола; истичући важност стандардизације преанализних варијабли у узорцима хируршке патологије. 67, 68

За разлику од претходних студија 10, 11 које указују на јачу повезаност слабог дифузног узорка са СДХД мутацијама, нисмо могли значајно да ојачамо ову одређену повезаност. Штавише, СДХБ и / или СДХА имунохистохемија не може увек бити феномен „све или ништа“. Конкретно, два мутирана СДХА - и СДХАФ2 тумора су показала хетерогени узорак експресије (слике 3 и 4) што је у складу са претходним опажањима која се тичу СДХБ имунохистохемије у аденому хипофизе који лучи мутацију СДХД гермлине . 37 У складу са истим линијама, пријављени су хетерогени обрасци експресије, како са имунохистохемијом протеина ММР, код Линцх синдрома, тако и са ПТЕН имунохистохемијом код Цовден синдрома. 49, 69, 70 Биолошка природа хетерогених тумора у овим генетским контекстима тренутно није позната. 37, 49, 69, 70 Због потенцијалне погрешне интерпретације хетерогених образаца за губитак протеина СДХБ и / или СДХА, препоручује се генетичко тестирање СДХ када се суочавају са таквим случајевима.

Image

Екстра адренални параганглиом који садржи СДХА (ц.1534Ц> Т, п.Арг512 *) мутацију гермлине, метастатски на парааортни лимфни чвор, показујући СДХБ имунонегативност ( а, ц ), али хетерогени образац бојења за СДХА ( б, д - ф ): централна област ( д ) убедљиво негативна за СДХА, периферна подручја ( ф ) убедљиво позитивна за СДХА и прелазне зоне ( е ) између изложених ћелија са нетакнутом СДХА експресијом мешано са ћелијама са одсутном СДХА експресијом. Три патолога су тачно класификовала овај узорак као хетероген за СДХА, док су преостала четири посматрача позитивна на СДХА. Обратите пажњу на грануларно цитоплазматско бојење за СДХА / СДХБ у нормалним ћелијама интратуморне фиброваскуларне мреже које служе као унутрашње позитивне контроле.

Слика пуне величине

Image

Параганглиом главе и врата мутиран СДХАФ2 (ц.232Г> А, п.Гли78Арг) који показује подручја убједљиво негативна за СДХБ и у мањој мјери подручја увјерљиво позитивна за СДХБ ( а ). Три патолога су тачно класификовала овај узорак као хетероген за СДХБ, док је преостала четири негативна за СДХБ, док су га сви посматрачи оценили као имунопозитивни СДХА ( б ). Обратите пажњу на зрнато, цитоплазматско бојење за СДХБ у нормалним ћелијама интратуморне фиброваскуларне мреже које служе као унутрашња позитивна контрола.

Слика пуне величине

Поред свеобухватне стратегије следеће генерације засноване на секвенцирању за анализу више гена осетљивости на феокромоцитом / параганглиом, 43, 44, 45 предложено је и неколико алгоритама као циљани приступ генетском тестирању у клиничкој пракси. 8, 71, 72, 73, 74 У овом брзо растућем пољу важност процене патогености „варијанте непознатог значаја“ постала је главни и сложен проблем с којим се суочавају дијагностичке лабораторије. Наши подаци додатно јачају улогу СДХБ / СДХА имунохистохемије у одређивању функционалности таквих варијанти, самостално или у интегрисаном приступу у силиконској анализи 75, 76 и / или западној блот анализи, сукцинатној ензимској анализи дехидрогеназе и мереним спектрометријским мерењима омјера сукцината / фумарата и других метаболита. 77, 78, 79

У тренутној студији закључујемо да СДХБ / СДХА имунохистохемија представља поуздан алат за идентификацију пацијената са СДХ-к мутацијама додатним корисним програмом за процену патогености СДХ варијанти непознатог значаја у новој секвенци нове генерације. Хетерогени СДХБ и / или СДХА имуноекспресијски образац мора бити праћен СДХ молекуларно-генетичким тестирањем, мада СДХБ-имунонегативни подскуп ВХЛ - и НФ1- мутираних параганглионских тумора доводи у питање специфичност имунохистохемије СДХБ. Стога, ако СДХ генетика не успе да открије мутацију у СДХБ-имунонегативном тумору, препоручује се метилација СДХЦ промотора и / или ВХЛ / НФ1 уз употребу циљаног секвенцирања следеће генерације. Наша открића наглашавају потребу за програмима процене квалитета који се тичу не само стандардизованих протокола бојења, већ и СДХБ / СДХА процедура имунохистохемијске процене. У перспективном окружењу, са стандардизованом фиксацијом ткива у комбинацији са локално фино подешеним протоколом имунохистохемијског бојења, осетљивост и специфичност имунохистохемије СДХА / СДХБ се могу побољшати.

Додатне информације

Екцел датотеке

  1. 1.

    Допунска табела 1

  2. 2

    Додатна табела 2

    Додатне информације прате рад на веб локацији Модерн Патхологи (//ввв.натуре.цом/модпатхол)